【摘要】 本发明公开了一种适用于拟南芥根系蛋白质组学研究的无菌水培方法。采用锥形塑料组织培养瓶和80目不锈钢筛网为栽培容器，注入水培营养液，并以注射针头和过滤器作为通气装置，通过在无菌工作台上完成播种与培养过程，方法简单，成本低，可以获得良好的重复性，完全避免了开放水培体系中根系损失和藻类、真菌的污染，同时又克服了无菌栽培体系中根系通气困难的难题，可以在短期内获得大量的高生物量、高一致性、完整健康的拟南芥根系，完全满足根系蛋白质组学研究对植物根系材料的严格要求。 ： 【专利类型】发明授权 【申请人】北京农学院 【申请人类型】学校 【申请人地址】102206 北京市昌平区回龙观镇北农路7号北京农学院 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】昌平区 【申请号】CN200810172502.7 【申请日】2008-10-28 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101371648B 【公开公告日】2010-11-10 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101371648B 【授权公告日】2010-11-10 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】A01G31/00; A01G31/06; A01C1/08 【发明人】王有年; 胡昊; 花宝光; 姚山; 师光禄 【主权项内容】一种适用于拟南芥根系蛋白质组学研究的无菌水培方法，其特征是：采用锥形塑料组织培养瓶和80目不锈钢筛网为栽培容器，注入水培营养液，并以注射针头和过滤器作为通气装置，通过在无菌工作台上完成播种与培养过程，获得拟南芥的完整健康根系；其中栽培容器制作方法如下：首先，以80目不锈钢筛网为栽培支持物，裁剪成12×4cm的长方形，折叠为U型；然后，将不锈钢筛网插入锥形塑料组织培养瓶中，注入水培营养液，筛网底部与营养液面保持5mm间隙；最后，盖好通气盖后湿热高压灭菌；其中水培营养液配制方法如下：在1/4霍格兰氏水培营养液中添加2.5％浓度的蔗糖；其中通气装置制作方法如下：首先，在组织培养瓶盖边缘处插入已灭菌的连有0.2μm过滤器的5号注射针头至瓶底；然后，用Parafilm膜封紧针头与瓶盖间的缝隙；最后，在过滤器另一端连接软管至通气泵；其中播种方法如下：首先，在无菌工作台上，将种子置于灭过菌的离心管中，用70％乙醇浸泡灭菌30秒，吸出乙醇；其次，用10％NaClO浸泡灭菌5分钟；然后，用无菌水清洗5次，每次30秒；最后，将灭菌后的种子悬浮于含1％琼脂糖和20％蔗糖的高密度溶液中，置于加热器上保持50℃，用1000μL移液枪，吸入种子，均匀的点到培养瓶的筛网上，间隔1cm；其中培养方法如下：首先，将培养瓶置于4℃冰箱中低温避光处理48小时；然后，将培养瓶转移到人工气候箱中，设置光周期为16小时光照，8小时黑暗，光强110μmol.-2.s-1，光照下温度为22℃，黑暗下温度为18℃，相对湿度70％，每日间隔7小时通气1小时，水培营养液每周更换1次。 【当前权利人】北京农学院 【当前专利权人地址】北京市昌平区回龙观镇北农路7号北京农学院 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】1211000040068750X7 【家族被引证次数】2
