【摘要】 本发明公开了一种检测DNA甲基化的方法,本发明提供的方法灵敏度更高,检测的DNA浓度更低,处理更快捷,更省略了各种分离、纯化步骤,能够方便地检测到低水平的DNA甲基化。相比于在临床应用的对样本质量要求很高的组织学方法,本发明仅需要很少量的DNA,可灵敏地检测抑癌基因的甲基化水平,在早期癌症的临床诊断方面具有重要意义。 【专利类型】发明授权 【申请人】中国科学院化学研究所 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】100080 北京市海淀区中关村北一街2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810055698.1 【申请日】2008-01-07 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101230399B 【公开公告日】2010-06-02 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101230399B 【授权公告日】2010-06-02 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】王树; 冯福德 【主权项内容】一种检测DNA甲基化的方法,依次包括以下步骤:1)用亚硫酸氢钠处理待测DNA,使所述待测DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶;2)以步骤1)的DNA为模板进行PCR扩增,并用荧光素标记步骤1)的DNA;3)通过所述荧光素与下述式(II)-式(VII)中任一所述的化合物荧光共振能量转移情况和甲基化特异引物或去甲基化特异引物确定所述待测DNA的目标CpG位点或序列的甲基化状态;式(II);所述式(II)化合物的Mn=3.5×104;式(III)所述式(III)化合物的Mn=4.1×104;式(IV);所述式(IV)化合物的Mn=2.7×104;式(V);所述式(V)化合物的Mn=1.9×104;式(VI);所述式(VI)化合物的Mn=2.3×104;式(VII);所述式(VII)化合物的Mn=2.5×104。F2008100556981C00011.tif, F2008100556981C00012.tif, F2008100556981C00013.tif, F2008100556981C00021.tif, F2008100556981C00022.tif, F2008100556981C00023.tif 【当前权利人】中国科学院化学研究所 【当前专利权人地址】北京市海淀区中关村北一街2号 【统一社会信用代码】12100000400012238A 【引证次数】1.0 【被引证次数】1 【他引次数】1.0 【被自引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】14