【摘要】 本发明提供了一种永生化大鼠骨髓基质细胞系及其制备方法。用本发明方法能在短时间内获得永生化大鼠骨髓基质细胞。本发明的hTERT永生化大鼠骨髓基质细胞系稳定，可以连续传代并保持二倍体核型和正常大鼠骨髓基质细胞特性，具备极强的增殖能力，真正实现了永生化。应用本发明方法所建立的永生化大鼠骨髓基质细胞系可以方便、快速地获得大量的具有二倍体核型的大鼠骨髓基质细胞。这对于研究骨髓基质细胞的体内外诱导和分化等无疑将具有巨大的促进作用。 【专利类型】发明授权 【申请人】首都医科大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100054 北京市右安门外西头条10号首都医科大学神经科学研究所 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】丰台区 【申请号】CN200810057663.1 【申请日】2008-02-04 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101255407B 【公开公告日】2010-11-17 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101255407B 【授权公告日】2010-11-17 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12N5/10; C12N15/52; C12N15/867; A61K35/28; A61P25/00; A61P25/16 【发明人】段春礼; 杨慧; 赵春礼; 孙晓红; 鲁玲玲 【主权项内容】一种制备永生化大鼠骨髓基质细胞系的方法，是将人端粒酶反转录酶催化亚基基因通过逆转录病毒载体导入大鼠骨髓基质细胞，得到永生化大鼠骨髓基质细胞系；所述人端粒酶反转录酶催化亚基的氨基酸序列如序列表中序列2所示；所述人端粒酶反转录酶催化亚基基因通过重组逆转录病毒载体pLPCX-Flag-hTERT导入大鼠骨髓基质细胞；所述重组逆转录病毒载体pLPCX-Flag-hTERT是将融合蛋白的编码基因插入逆转录病毒载体pLPCX的多克隆位点得到的重组载体；所述融合蛋白为在人端粒酶反转录酶催化亚基的N端融合FLAG表位标签得到的融合蛋白；所述重组逆转录病毒载体pLPCX-Flag-hTERT按照如下方法导入大鼠骨髓基质细胞：将pLPCX-Flag-hTERT转染到包装细胞系，被包装成具有侵袭能力但复制缺陷的带有人端粒酶反转录酶催化亚基基因的病毒后，再转导大鼠骨髓基质细胞。 【当前权利人】首都医科大学 【当前专利权人地址】北京市右安门外西头条10号首都医科大学神经科学研究所 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12110000400688529J 【家族被引证次数】6
