【摘要】 本发明涉及一种核酸等温扩增检测巨细胞病毒(CMV)的方法及其试剂盒，检测步骤依次包括：巨细胞病毒mRNA模板在60～70℃下解链后降温；加入逆转录酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶，在引物的引导下于37～42℃进行等温扩增，获得RNA扩增子；然后利用纳米金探针和捕获探针检测扩增子，通过层析杂交显色反应获得检测结果。杂交膜出现显色条带为mRNA阳性，无条带为阴性。采用本方法的试剂盒可快速准确地检测巨细胞病毒mRNA。 【专利类型】发明申请 【申请人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】200010 上海市黄浦区复兴东路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】上海市 【申请人区县】黄浦区 【申请号】CN200810201684.6 【申请日】2008-10-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760564A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/70; C12Q1/68; G01N21/76 【发明人】吴大治; 夏懿 【主权项内容】一种巨细胞病毒(CMV)核酸等温扩增检测方法，采用逆转录-转录和纳米金探针检测层析杂交原理，其扩增对象为从CMV中提取的mRNA模板；其特征在于，RNA模板通过采用逆转录酶、核糖核酸酶H以及RNA聚合酶等温扩增，产生的大量RNA扩增子和纳米金颗粒标记的检测探针、生物素(或地高辛)标记的捕获探针结合形成杂交复合物引起光学性质变化，最后该复合物和固定在层析膜上亲和素(或抗地高辛抗体)结合形成显色检测条带。 【当前权利人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【当前专利权人地址】上海市黄浦区复兴东路2号; 上海市宜山路1289号 【专利权人类型】其他股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】913100001330605412 【被引证次数】5 【被他引次数】5.0 【家族被引证次数】5
