【摘要】 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶在转化白藜芦醇苷制备白藜芦醇中的应用，主要涉及(1)菌种选择，(2)制备β-葡萄糖苷酶粗酶液，(3)酶转化白藜芦醇苷反应，(4)转化液收集，(5)白藜芦醇的提取纯化等步骤。本发明利用微生物产生的β-葡萄糖苷酶粗酶液对白藜芦醇苷进行转化，收率高，产物较单一，白藜芦醇的分离提取步骤简单，极易规模化生产，具有极好的市场前景并能产生可观的经济效益。 【专利类型】发明授权 【申请人】山东大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】250100 山东省济南市历城区山大南路27号 【申请人地区】中国 【申请人城市】济南市 【申请人区县】历城区 【申请号】CN200810014833.8 【申请日】2008-03-20 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101255449B 【公开公告日】2010-12-29 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101255449B 【授权公告日】2010-12-29 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12P7/22; C12R1/80; C12R1/845; C12R1/885; C12R1/785; C12R1/685; C12R1/66 【发明人】宋欣; 曲音波; 袁晓华 【主权项内容】β‑葡萄糖苷酶在转化白藜芦醇苷制备白藜芦醇中的应用，其特征在于，以下述步骤实现：(1)菌种选择：选用桔青霉(Penicillium citrinum)CGMCC 3.2938，少根根霉(Rhizopusarrhizus)CGMCC No.1963，杨奇青霉(Penicillium janczewskii)CGMCC NO.0668，绿色木霉(Trichoderma viride)CGMCC No.1962，毛霉(Mucor sp.)CGMCC NO.0151，黑曲霉(Aspergillus niger)CGMCC 0496，黑曲霉(Aspergillus niger)CGMCC 0751，土曲霉(Aspergillus terreus)CGMCC No.0569中的一种菌作为产β‑葡萄糖苷酶的菌种；(2)制备β‑葡萄糖苷酶粗酶液：将步骤(1)所述菌种以常规量接种于培养基中，在25℃～50℃，摇床转速120～220rpm的条件下，产酶发酵12～144小时，然后将所有发酵物在5000～10000r/min的转速下离心15～40min，收集上清液即获得β‑葡萄糖苷酶粗酶液；(3)酶转化白藜芦醇苷反应：取含有白藜芦醇苷的植物样品，将其粉碎至60目，然后按1g粉碎的样品比5～10ml粗酶液的比例，向粉碎的样品中加入步骤(2)制得的β‑葡萄糖苷酶粗酶液，充分搅拌后于25℃～45℃条件下静置转化反应10～24小时；或充分搅拌后置于25℃～45℃、摇床转速80～180rpm条件下转化反应5～24小时；(4)转化液收集：将步骤(3)转化反应后的所有物料以4000～8000r/min条件离心10～15min，收集上清液即得含白藜芦醇的溶液；(5)白藜芦醇的提取纯化：向步骤(4)获得的含白藜芦醇的溶液中加入其1倍体积量的50～95％的乙醇，在50℃～100℃温度下进行加热回流提取，得纯β‑葡萄糖苷酶转化产物——白藜芦醇液；其中，步骤(2)所述培养基的配方为：10～40g/L麦麸，10～40g/L草粉，5～10g/L硫酸铵或3～5g/L尿素，和0.5～5ml/L微量离子液；其中，所述微量离子液是如下组分量的溶液：FeSO4 0.5ml/L、MnSO4 0.16ml/L、ZnSO4 0.14ml/L和CoCl20.2ml/L。 【当前权利人】山东大学 【当前专利权人地址】山东省济南市历城区山大南路27号 【统一社会信用代码】12100000495570303U 【引证次数】2.0 【被引证次数】2 【他引次数】2.0 【被他引次数】2.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】20
