【摘要】 本发明提供一种作为微生物添加剂的地衣芽孢杆菌外膜蛋白的提取方法，包括：超声波破壁、离心粗提、SDS沉淀、SDS和PBS再次沉淀、透析、超滤纯化。其中，所述的超声波的工作参数，优选功率450w、破碎时间2s、间断1s、反复破碎80次，超滤优选使用0.45μm的微孔滤膜或截留分子量为8600道尔顿的超滤膜(层析柱等)。本发明方法去除大量破壁后的细胞碎片及一些杂蛋白，再经过超滤后达到了有粗提到精提的效果，并且，浸提物在短时间内保持不变，生物活性不减，同时提高了破碎速度，缩短了破碎时间，可极大地提高提取效率，能满足工业生产的需要。 【专利类型】发明申请 【申请人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】300300 天津市东丽开发区六经路6号 【申请人地区】中国 【申请人城市】天津市 【申请人区县】东丽区 【申请号】CN200810154338.7 【申请日】2008-12-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101759771A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C07K1/34; C07K1/14; C07K14/32; C07K1/00; C07K14/195 【发明人】王小娥; 苏建东; 李旭东 【主权项内容】1.一种用于地衣芽孢杆菌外膜蛋白的提取方法，步骤包括：(1)利用超声波进行地衣芽孢杆菌细胞的破壁；(2)粗提物进行6000rpm，15min离心，3次，取上清液2L；(3)在上清中加15ml 2％十二烷酰肌氨酸钠溶液充分混匀，室温作用1h，于4℃100, 000r/min超速离心1h；(4)将沉淀用0.6mL 0.1moL/L PBS(pH7.4)和等量2％十二烷酰肌氨酸钠溶解，室温作用2h，于4℃100, 000r/min超速离心1h，将沉淀适量的溶于0.1moL/L PBS(pH7.4)中；(5)经过透析、超滤处理后，分装。 【当前权利人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【当前专利权人地址】天津市东丽开发区六经路6号 【专利权人类型】股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】91120116730357968N 【被引证次数】3 【被他引次数】3.0 【家族被引证次数】3
