【摘要】 本发明公开了一种从冬虫夏草发酵菌丝体中提取和纯化多糖的方法。该方法以冬虫夏草发酵菌丝体为原料，经过脱脂，水提、浓缩、醇沉得到冬虫夏草粗多糖。粗多糖用蒸馏水复溶，Sevag脱蛋白、H2O2脱色、透析、醇沉得到初步纯化多糖；最后用离子交换层析进行纯化，分步收集得到不同的组分，透析、醇沉，再依次用无水乙醇、丙酮、乙醚等洗涤后，干燥得冬虫夏草多糖。本发明得到的冬虫夏草纯化多糖，经紫外吸收光谱和凝胶层析鉴定MPS2为均一多糖，总糖含量高，提取步骤简便，成本低廉。 ： 【专利类型】发明授权 【申请人】中国科学院微生物研究所 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】100080 北京市海淀区中关村北一条13号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810116219.2 【申请日】2008-07-07 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101307112B 【公开公告日】2010-12-15 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101307112B 【授权公告日】2010-12-15 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C08B37/00 【发明人】姚一建; 董彩虹 【主权项内容】一种冬虫夏草发酵菌丝体多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)将粒径小于830μm的冬虫夏草菌丝体进行脱脂处理，得到脱脂的冬虫夏草菌丝体；所述脱脂处理中所用的试剂是体积百分含量为90‑100％的乙醇，脱脂时间为12‑24小时；(2)用水对步骤(1)得到的脱脂冬虫夏草菌丝体进行提取，收集提取液；所述提取为回流提取；所述提取的温度为70‑90℃；所述提取中，至少提取一次，每次提取的时间为1‑3小时；(3)对步骤(2)得到的提取液用无水乙醇进行沉淀，将所述沉淀依次用乙醚、丙酮和无水乙醇洗涤，得到冬虫夏草菌丝体多糖；所述方法还包括以下纯化的步骤：(a)脱蛋白：采用Sevag法对步骤(3)所制备的冬虫夏草菌丝体多糖进行脱蛋白，得到脱蛋白的冬虫夏草菌丝体多糖；(b)脱色：将步骤(a)所述脱蛋白的冬虫夏草菌丝体多糖用过氧化氢进行脱色，得到脱色的冬虫夏草菌丝体多糖；(c)离子交换层析：采用DEAE‑52离子交换层析柱对步骤(b)所述脱色的冬虫夏草菌丝体多糖进行分离，先用pH值为6‑8、10mMTris‑HCl缓冲液进行洗脱，再用pH值为6‑8含有0.1M‑0.5M NaCl和10mMTris‑HCl的水溶液进行洗脱，收集糖峰，得到纯化的冬虫夏草菌丝体多糖。。 【当前权利人】中国科学院微生物研究所 【当前专利权人地址】北京市海淀区中关村北一条13号 【统一社会信用代码】12100000400012318X 【引证次数】4.0 【被引证次数】3 【自引次数】4.0 【被他引次数】3.0 【家族引证次数】4.0 【家族被引证次数】27
