【摘要】 本发明属于生物工程技术领域。本发明是将蛋白A的B结构域基因单体根据大肠杆菌密码子的偏爱性进行优化,构建六串体插入热诱导型大肠杆菌载体pBV220,构建了含有该基因的大肠杆菌表达载体及其转化的大肠杆菌DH5α重组株和利用此菌株生产重组蛋白A的方法。此菌株所产生的可溶性重组蛋白A达到细菌可溶性蛋白总量的80%以上,以后只经镍离子螯合层析和分子筛柱层析即可将重组蛋白A纯化到95%以上纯度,且该蛋白具有表达量高、成本低、易纯化等优点。用其制备的重组蛋白A亲和填料具有人IgG吸附载量高、proA脱落少等优点。本发明为获得质量高且价格便宜的抗体(药物)纯化介质重组蛋白A提供了一条切实可行的途径。 【专利类型】发明申请 【申请人】本元正阳基因技术有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】100176 北京市大兴区北京经济技术开发区永昌中路6号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】大兴区 【申请号】CN200810240553.9 【申请日】2008-12-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760466A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101760466B 【授权公告日】2015-12-09 【授权公告年份】2015.0 【IPC分类号】C12N15/31; C12N15/70; C07K14/31; C07K1/22; C07K1/00; C07K14/195 【发明人】宫照龙; 何新舟; 曹晖; 许允立 【主权项内容】一种人工重组蛋白A的基因表达序列,其特征是:1)其序列根据宿主菌大肠杆菌密码子的特点进行了优化;2)包含6个人工重组蛋白A的基因单体重复序列;3)包含his标签序列。 【当前权利人】本元正阳基因技术有限公司 【当前专利权人地址】北京市大兴区北京经济技术开发区永昌中路6号 【专利权人类型】其他有限责任公司 【统一社会信用代码】91110302722619788U 【被引证次数】8 【被他引次数】8.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】8