【摘要】 本发明公开了一种黑金丝柚木的快速繁殖方法，通过采集枝条、枝条处理、消毒处理、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗和苗床管理后得到苗高30厘米以上的黑金丝柚木种苗。该方法容易获得繁殖材料，繁殖倍数大，这种工厂化生产苗木的方法，操作方便，苗木生产成本低，可快速培育出大量的苗木，具有良好的市场应用前景。 【专利类型】发明授权 【申请人】中国科学院西双版纳热带植物园 【申请人类型】机关团体 【申请人地址】650223 云南省昆明市学府路50号版纳热带植物园昆明分部 【申请人地区】中国 【申请人城市】昆明市 【申请人区县】五华区 【申请号】CN200810058972.0 【申请日】2008-09-26 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101385440B 【公开公告日】2010-12-29 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101385440B 【授权公告日】2010-12-29 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】A01H4/00; A01G31/00; C12N5/04 【发明人】唐寿贤; 吴挺波; 邹寿青; 刀祥生; 杨婷婷; 李扬苹 【主权项内容】一种黑金丝柚木的快速繁殖方法，该方法采用下述顺序的步骤：(1)采集枝条：于每年的3～8月份，采集当年生的带梢枝条，长度为9～11厘米；(2)枝条处理：在2～6小时内将采集到的枝条，用自来水不间断地冲冼30min，然后除去叶片，将枝条切成长5cm的茎尖或茎段，得到外植体；(3)消毒处理：将外植体先用无菌水漂冼2～3次，接着用70％的酒精表面消毒30s，再用无菌水漂洗两次，然后置于0.2％的升汞溶液中浸泡15～20min，所述的升汞溶液中加入1～2滴的吐温‑80，取出后，用无菌水荡洗6～8次；(4)在无菌条件下将消毒处理后的外植体切成长1.5～2cm，直径0.5～1.5cm的块状；(5)诱导培养：将块状的外植体接入诱导培养基中培养，培养基的pH值为5.8～6.0，培养室内温度为30±2℃，光照强度为1200lx，光照时间为12h/d，诱导培养过程中，外植体逐渐分化出多个不定芽，当不定芽长到6～8cm高度时，进行增殖培养；(6)增殖培养：将不定芽分割为1～2cm长的茎段，然后转到增殖培养基中培养，培养室温度为30±2℃，光照强度1200lx，光照时间为12h/d；增殖培养过程中，茎段基部切口处开始膨大，并不断产生愈伤组织，然后从基部抽出2～3个不定芽，同时很快长出叶片，形成小植株；将小植株切割成长1cm的茎段，转接在同样的培养基上进行培养；每隔25～30天继代培养一次；经5～10次继代培养后进行生根培养；(7)生根培养：切取长2～3cm的增殖芽，接种到培养瓶中的生根培养基上进行诱导生根培养，培养温度为30±2℃，光照强度为1200lx，光照时间12h/d；增殖芽培养10天以后，基部可见白色突起的根瘤，15天后生长为明显的白色幼根，1个月后，苗高达到6～9cm，根也伸长至3～4cm，并生长出侧根或根毛，此时提高光照度为1400lx；当小苗长成浓绿色的健壮苗时，移出培养室进行炼苗；(8)炼苗：先将培养瓶连同苗从培养室内移出，置于光照强度为4000～8000lx、温度28～30℃的环境条件下锻炼7～10天，然后打开瓶盖，加入20～30g的水，搅动培养基，用镊子取出苗，洗净附着于小苗根部的培养基，再置于500倍液的多菌灵溶液中10～15min，或置于0.1％的高锰酸钾溶液中3～5min；取出后冼净，然后移栽到苗床中的营养土内培育裸根苗或袋装苗；(9)苗床管理：移栽后立即淋透水，并覆盖薄膜保湿，加盖荫蔽度为80％～90％的遮阳网，喷雾保湿，5天后用多菌灵800～1000倍液喷雾预防病害；移栽后20～30天，解除薄膜，使幼苗慢慢地适应自然条件下生长；苗木长出2～3对新叶时，解除遮阳网，用氮、磷、钾复合肥施肥，当苗木高度达到30厘米以上时出圃种植；其中，所述的诱导培养基的原料组成包括MS、6BA0.2mg/L、NAA0.01mg/L、琼脂6000mg/L和蔗糖30000mg/L；所述的增殖培养基的原料组成包括MS、6BA0.1mg/L、NAA0.01mg/L、琼脂6000mg/L和蔗糖30000mg/L；所述的生根培养基的原料组成包括1/2MS、NAA1mg/L、活性炭1000mg/L、琼脂6000mg/L和蔗糖20000mg/L。 【当前权利人】中国科学院西双版纳热带植物园 【当前专利权人地址】云南省昆明市学府路50号版纳热带植物园昆明分部 【统一社会信用代码】121000004312701171 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】10
