【摘要】 本发明涉及一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法。本发明分别针对人巨细胞病毒(HCMV)基因组的UL122和UL123基因设计了两组检测引物和探针，通过同时检测两个基因降低了因HCMV基因组发生突变导致的假阴性率的发生。本发明技术能快速、简便的对HCMV DNA进行定性和定量检测，具有较高的特异性和灵敏性。 【专利类型】发明申请 【申请人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】200010 上海市黄浦区复兴东路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】上海市 【申请人区县】黄浦区 【申请号】CN200810201649.4 【申请日】2008-10-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760560A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/70; C12Q1/68 【发明人】何剑军; 吴大治; 夏懿 【主权项内容】1.一种人巨细胞病毒(HCMV)荧光PCR检测方法，其特征在于包含两对特异性引物和两条特异性探针，扩增目标片段长度分别为91bp和160bp，序列为：引物1：5`-ACCCTGTTCTTCCTCGCTAT-3`(Seq No.1)引物2：5`-GCCCGAGCCCGACTTTA-3`(Seq No.2)引物3：5`-CCAGTGAATTTCTCTTCCGTCT-3`(Seq No.3)引物4：5`-CATAGAGATAGCGATAAATGAGTC-3`(Seq No.4)探针1：5`-GATACAGCCGGCGGTATCGA-3`(Seq No.5)探针2：5`-CTCCTTGATTCTATGCCGCACCAT-3`(Seq No.6)或者与上述序列同源性大于75％的序列、或者上述所有序列的碱基互补序列。其中，引物1、引物2与探针1组合，用于检测HCMV基因组UL122基因；引物3、引物4与探针2组合，用于检测HCMV基因组UL123基因。两条标记探针的荧光发光基团可以相同也可以不同，为FAM、TET、JOE、Cy3、Cy5、Cy5.5、Fluorescein、Rhodamine、Rhodamine Red、Rhodamine Green、Rhodamine 6G、Oregon Green 488、Oregon Green 500、Oregon Green 514、Texas Red、TAMRA、Inosine、HEX、FITC、Acridine orange、或ROX中的任意两种组合；荧光淬灭基团为DABCYL、DABSYL、TAMRA、BHQ-1、BHQ-2或BHQ-3中的任意一种或一种以上的组合。 【当前权利人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【当前专利权人地址】上海市黄浦区复兴东路2号; 上海市宜山路1289号 【专利权人类型】其他股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】913100001330605412 【被引证次数】14 【被自引次数】2.0 【被他引次数】12.0 【家族被引证次数】14
