【摘要】 本发明的目的是建立一种快速测定发光细菌活细菌总数的方法，特别是一种基于MTT显色原理的活 细菌计数方法。 本发明采用MTT比色法测定发光细菌活菌数，通过对MTT比色法的检测条件进行了优化选择。确定 最佳的测定发光细菌活细菌总数的方法。 本发明首先将MTT和活菌体内琥珀酸脱氢酶反应生成的产物formazan溶于DMSO后，在400nm一 800nm范围内测定光吸收值，确定检测的最大吸收波长为500nm。通过优化时间、温度对吸光值的影响， 确定最佳的测定条件为：反应时间2h，反应温度25℃。 本发明检测原理新颖，检测方法简便快速，重复性好，可适用于食品卫生与安全、环境检测等领域发 光细菌活细胞数量的定量检测。同时可应用于微生物学、免疫学以及其他学科的实验中，作为活细菌材料 活性和数量的测定。本发明还可发展成为细菌总数测定的方法，用于替代传统的测定活体细胞总数的方法。 【专利类型】发明申请 【申请人】中国海洋大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】266003山东省青岛市崂山区松岭路238号 【申请人地区】中国 【申请人城市】青岛市 【申请人区县】崂山区 【申请号】CN200810140093.2 【申请日】2008-09-22 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101620188A 【公开公告日】2010-01-06 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】G01N21/76; C12Q1/02 【发明人】王静雪; 林洪; 王亚群 【主权项内容】1一种快速测定发光细菌活细菌总数的方法，其特征是： (1)基于MTT显色的原理； (2)测定波长为500nm； (3)测定温度为25℃； (4)反应时间为2h。 【当前权利人】中国海洋大学 【当前专利权人地址】山东省青岛市崂山区松岭路238号 【统一社会信用代码】12100000427403888T 【被引证次数】7 【被他引次数】7.0 【家族被引证次数】7
