【摘要】 本发明公开了一种生产高纯度γ-干扰素的纯化方法，生产步骤包括发酵、粗提发酵液、阳离子层析柱纯化、硫酸铵纯化、Sephacryl S-200层析柱纯化、Sephadex G-75色谱柱纯化等，其中在层析之前先去热原。本发明方法无需要单克隆抗体层析柱，能经济、快速、高效地获得纯度高于97.5％γ-干扰素，在γ-干扰素的生产和研究领域具有广阔的应用前景。 【专利类型】发明申请 【申请人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】300300 天津市东丽开发区六经路6号 【申请人地区】中国 【申请人城市】天津市 【申请人区县】东丽区 【申请号】CN200810154341.9 【申请日】2008-12-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101759768A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C07K1/18; C07K1/16; C12P21/04; C12R1/84; C07K1/00 【发明人】王丽娟; 苏建东; 李旭东 【主权项内容】1.一种生产γ-干扰素的纯化方法，步骤包括：(1)重组菌株进行发酵；(2)离心发酵液(6500rpm，离心15min)取上清，通过微滤除杂、超滤浓缩；(3)浓缩液过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析)，以A液(20mM NH4Ac，pH8)和B液(20mM NH4Ac，0.7M NaCl，pH8)组成的离子强度递增溶液洗脱，收集第四个峰；(4)加入硫酸铵30％(v/v)至稍混浊，离心取上清(7000rpm，离心10min)；(5)过Sephacryl S-200凝胶层析柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱峰；(6)过Sephadex G-75色谱柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱液；(7)得到纯度高于97.5％的干扰素原液，置于4℃保存。 【当前权利人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【当前专利权人地址】天津市东丽开发区六经路6号 【专利权人类型】股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】91120116730357968N 【被引证次数】3 【被他引次数】3.0 【家族被引证次数】3
