【摘要】 本发明名称：链霉素沉淀法增加异常朊蛋白(PrPSc)在免疫蛋白印迹(Western blot)检测的敏感性。 所属的技术领域：传染病诊断与研究。 所要解决的技术问题：当病人或动物的组织器官及体液中存在少量的异常朊蛋白(PrPSc)，用常规的检测 技术不能有效检测出。 技术方案要点：我们用终浓度为60mmol/L的链霉素处理蛋白酶K消化异常朊蛋白(PrPSc)贮存液，通过 离心沉淀异常朊蛋白(PrPSc)，用免疫蛋白印迹(Western blot)对异常朊蛋白(PrPSc)的链霉素富集效果 进行检测。基于链霉素沉淀免疫蛋白印迹(Western blot)，无论是在低浓度或是大容积的条件下，均可显 著的提高对异常朊蛋白(PrPSc)检测的敏感性。 主要用途：因而该方法是一种敏感、特异、快速及灵活的检测方法，有潜力用于脑组织、外周组织及体液 中低水平的异常朊蛋白(PrPSc)的检测。 【专利类型】发明申请 【申请人】中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 【申请人类型】机关团体 【申请人地址】100052北京市宣武区迎新街100号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】西城区 【申请号】CN200810134408.2 【申请日】2008-07-22 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101634653A 【公开公告日】2010-01-27 【公开公告年份】2010 【发明人】董小平; 韩俊; 高晨; 石琦; 田蝉 【主权项内容】组织或体液中异常朊蛋白(PrPSc)蛋白酶K消化后，将60mmol/L链霉素加入到处理后的样品中，37℃ 孵育30min，10000g离心5min，其沉淀用2×蛋白加样缓冲液混合，同时加入终浓度为6mol/L的尿素， 涡漩振荡，100℃变性10min后，10000g离心5min，取上清，用于免疫蛋白印迹(Western blot)检测。 1、样品处理所需链霉素的浓度及孵育时间； 2、链霉素作用后异常朊蛋白(PrPSc)沉淀所需离心条件及处理技术； 【当前权利人】中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 【当前专利权人地址】北京市宣武区迎新街100号 【统一社会信用代码】121000004008239033
