【摘要】 本发明涉及分析化学领域,具体地,本发明涉及一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法。所述方法包括以下步骤:1)破碎藻细胞;2)使用甲醇粗提;3)液液萃取;4)C18固相萃取;5)Sephadex LH-20凝胶层析,收集MCLR活性峰;以及6)DEAE离子交换层析,收集MCLR活性峰,制得MCLR纯品。本发明提供的方法优点在于该法具有简便有效、经济实用、在一般实验条件下即可实现并且相对稳定的特点,能够制备毫克级MCLR纯品,经HPLC分析,其纯度达85%以上。 【专利类型】发明申请 【申请人】北京林业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100083 北京市海淀区清华东路35号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810227951.7 【申请日】2008-12-03 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101750460A 【公开公告日】2010-06-23 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101750460B 【授权公告日】2012-09-19 【授权公告年份】2012.0 【IPC分类号】G01N30/06; G01N30/00 【发明人】梁文艳; 王金丽; 陈莉 【主权项内容】1.一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)破碎藻细胞;2)向破碎的藻细胞中加入甲醇,使甲醇的终浓度为40~100%,进行藻毒素的振荡提取,收集提取后的上清液,蒸发去除甲醇;3)对步骤2)得到的溶液进行液液萃取,抽取水相,得到MCLR水溶液;4)对步骤3)得到的MCLR水溶液进行C18固相萃取,用0~20%的甲醇洗脱杂质,最后用50~100%甲醇洗脱MCLR,将得到的MCLR洗脱液蒸发至干,并用100%甲醇溶解,得到MCLR甲醇溶液;5)将步骤4)得到的MCLR甲醇溶液上样至Sephadex LH-20凝胶层析柱,进行层析分离,收集MCLR活性峰,浓缩蒸干后溶于超纯水中,得到MCLR水溶液;以及6)将步骤5)得到的MCLR水溶液上样至DEAE离子交换层析柱,收集MCLR活性峰,制得MCLR纯品。 【当前权利人】北京林业大学 【当前专利权人地址】北京市海淀区清华东路35号 【统一社会信用代码】12100000400006719W 【被引证次数】5 【被他引次数】5.0 【家族引证次数】8.0 【家族被引证次数】5