【摘要】 本发明公开了一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法。该方法包括以下步骤：1)将植物材料在液氮中研碎，加入-20℃预冷的含有10g/100mL的三氯乙酸和0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，-20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；2)向沉淀中加入4倍沉淀体积的含有0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液，混匀-20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到总蛋白；4)对步骤3)的总蛋白进行等电聚焦电泳，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳结束后进行银染。 【专利类型】发明授权 【申请人】中国农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100094 北京市海淀区圆明园西路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810104851.5 【申请日】2008-04-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101260146B 【公开公告日】2010-11-03 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101260146B 【授权公告日】2010-11-03 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C07K1/26 【发明人】韩振海; 王晶莹; 许雪峰; 李天忠; 王忆 【主权项内容】一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法，依次包括以下步骤：1)将苹果属植物材料在液氮中研碎后，向所述植物材料中加入-20℃预冷的含有10％的三氯乙酸和0.07％的β-巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，-20℃下放置1h，然后12000rpm离心15min，弃上清，保留沉淀；2)向所述沉淀中加入是所述沉淀的4倍体积的含有0.07％的β-巯基乙醇的丙酮溶液，混匀后，放置于-20℃1h，然后12000rpm离心15min，弃上清，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到苹果属植物蛋白质；4)对步骤3)的苹果属植物蛋白质先进行等电聚焦电泳，然后再沿其垂直方向进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；所述等电聚焦电泳中，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，所述聚丙烯酰胺凝胶电泳中采用的染色方法是银染；所述百分数均为质量百分含量；所述苹果属植物为小金海棠；所述苹果属植物材料为白色幼嫩初生根。 【当前权利人】中国农业大学 【当前专利权人地址】北京市海淀区圆明园西路2号 【统一社会信用代码】12100000400018162G 【引证次数】1.0 【被引证次数】1 【他引次数】1.0 【被他引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】10
