【摘要】 本发明提供一种军团菌环介导恒温扩增基因试剂盒及检测方法。其中试剂盒采用生物信息平台进行大规模基因组分析，引入简并碱基和基因组分型处理，使引物设计更加完善。阳性率可大于99.9％假阳性率小于0.1％。并且本发明的样品前处理，根据检测试剂盒的需要进行的简易DNA提取方法缩短了检测时间，扩增在不到1小时即可完成，且产率高，提高了检测灵敏度，用于病原微生物的检测和传染病的诊断中，对结核分枝杆菌的最低检测极限达到10个细胞以内，标本的检出率达到97％，使得试剂盒的实际应用价值大大提高。另外，本发明在反应后加入染料，通过肉眼观察鉴定，无需电泳等其他任何分析步骤，结果鉴定更为直观清晰，避免了光线引起的误差。 【专利类型】发明申请 【申请人】广州迪澳生物科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】510663 广东省广州市科学城科学大道182号创新大厦C2区1303 【申请人地区】中国 【申请人城市】广州市 【申请人区县】黄埔区 【申请号】CN200810219352.0 【申请日】2008-11-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101736082A 【公开公告日】2010-06-16 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/68; C12Q1/04 【发明人】石磊; 郭一平; 黄帆; 常彦磊; 鲁曦; 肖晓斌; 叶蕾 【主权项内容】1.一种军团菌恒温基因扩增快速检测试剂盒，其特征在于，包括：引物混合液：四条引物浓度均为10pmol/μl，引物序列如下：外引物1：GCGATATCTGGTGGTCTGCA外引物2：CCGTGGTTTCGAAAACAGCG内引物1：AGACCACTCGTACCCGTCGCTTTTCGGTGGTTAACGCGCTATC内引物2：ATGAGAAGTCGGAACCCCTGGGTTTTACCGTTGACCCCGTCTTCTBst DNA聚合酶反应液：10mM脱氧核苷三磷酸dNTP，10×ThermoPol Buffer反应缓冲液，150mM硫酸镁MgSO4；样品预处理液：20mM Tris-HCl，pH 8.0，2mM EDTA，1.2％Triton X-100；荧光染料SYBR Green I；阳性对照为军团菌基因组DNA。 【当前权利人】广州迪澳生物科技有限公司 【当前专利权人地址】广东省广州市科学城科学大道182号创新大厦C2区1303 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】914401166756910573 【引证次数】2.0 【被引证次数】2 【他引次数】2.0 【被自引次数】1.0 【被他引次数】1.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】2
