【摘要】 本发明公开了一种邓恩桉组培快繁的生根方法，包括(1)无菌苗培育，(2)芽的继代增殖，(3)试管苗复壮，(4)诱导生根，(5)试管苗移栽等步骤；本发明通过无菌苗的增殖培养和壮苗培养后接种于第一生根培养基和第二生根培养基诱导出完整的植株，解决了邓恩桉组培苗繁殖系数低尤其是难于生根的问题；利用本发明的技术方法可在短时间内提供大量种苗，以代替昂贵的进口种子，满足大规模工厂化育苗和市场的大量需求。 【专利类型】发明授权 【申请人】山东省林业科学研究院 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】250014 山东省济南市历下区文化东路42号 【申请人地区】中国 【申请人城市】济南市 【申请人区县】历下区 【申请号】CN200810138771.1 【申请日】2008-08-05 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101331853B 【公开公告日】2010-09-29 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101331853B 【授权公告日】2010-09-29 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】A01H4/00; C12N5/04N; C12N5/04 【发明人】夏阳; 燕丽萍; 王太明; 刘翠兰; 李双云 【主权项内容】一种邓恩桉组培快繁的生根方法，步骤包括：(1)无菌苗培育，(2)芽的继代增殖，(3)试管苗复壮，(4)诱导生根，(5)试管苗移栽；其特征在于：步骤(1)所述无菌苗培育的方法是：挑选饱满无病虫害的种子，消毒后接种到萌发培养基中，进行昼夜光照周期培养，光照强度为38～42μmol·m-2·s-1，光照时间13～15h·d-1，昼温度25±1℃，夜温度18±1℃，5～8d后种子萌发，获得无菌苗；步骤(2)所述芽的继代增殖培养的方法是：将步骤(1)培育的无菌苗从子叶基部剪断，带子叶转接于增殖培养基I或II中，以步骤(1)所述条件进行昼夜光照周期培养，7～10d后诱导形成丛生芽，形成的丛生芽再分割成带2～3个芽的芽丛接种于增殖培养基I或II中进行继代增殖，继代周期15～20d，在继代增殖培养中所述2种增殖培养基I或II交替使用；步骤(3)所述试管苗复壮培养的方法是：将步骤(2)苗高1～2厘米、带1～2个芽的小苗接种到壮苗培养基中，以步骤(1)所述条件进行昼夜光照周期培养12～15d后进行诱导生根；步骤(4)所述诱导生根培养的方法是：待步骤(3)培养复壮的试管苗长到3～4cm，将其切成单株，接种到第一生根培养基中培养6～9d，再转接到第二生根培养基中培养8～12d获得生根植株，培养条件为步骤(1)所述昼夜光照周期培养；步骤(5)所述试管苗移栽的方法是：把生根的瓶苗移到遮光度80％～90％遮荫网塑料大棚温室条件下适应1d后，逐渐打开瓶苗封口膜降低湿度，2～3d后，用镊子将苗夹出，用清水洗去基部残留的培养基，移栽到装有混合基质育苗盘中，利用间歇喷雾装置或人工喷水保持相对湿度在80％以上，经驯化炼苗5～6d后，栽入盆栽基质中继续培养3～4d后，然后转移到遮光度约50％～60％遮荫网通风棚内培养8～12d定植于大田；其中所述的混合基质育苗盘的成分以体积比计为：细沙∶土∶育苗基质＝4∶1∶1，混合基质育苗盘上面再放置细沙1～2cm；盆栽基质的成分以体积比计为：沙壤土∶炉灰∶育苗基质＝5∶1∶1；上述方法各步中采用的培养基及其配方是：萌发培养基是指：MS+0～0.5mg/L 6-BA+25～35g/L蔗糖+4～6g/L琼脂，pH值5.7～5.9；增殖培养基I是指：MS+0.4～0.6mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L KT+0.2～0.4mg/LIBA+25～35g/L蔗糖+4～6g/L琼脂，pH值5.7～5.9；增殖培养基II是指：MS+0.4～0.6mg/L ZT+0.2～0.4mg/L IAA+25～35g/L蔗糖+4～6g/L琼脂，pH值5.7～5.9；壮苗培养基是指：MS+0～0.1mg/L KT+0～0.05mg/LNAA+25～35g/L蔗糖+4～6g/L琼脂，pH值5.7～5.9；第一生根培养基是指：1/2MS+2.0～4.0mg/L IBA+0.005～0.02mg/L NAA+0.05～0.2mg/L KT+15～25g/L蔗糖+6～8g/L琼脂，pH值5.2～5.5； 第二生根培养基是指：1/2MS+15～25g/L蔗糖+6～8g/L琼脂，pH值5.2～5.5；其中1/2MS是指培养基的组分中MS大量元素减半及其余为MS全量元素，其具体组分为：KNO3950mg·L-1，NH4NO3825mg·L-1，MgSO4·7H2O 185mg·L-1，KH2PO485mg·L-1，CaCl2·2H20 220mg·L-1，MnSO4·4H2O 22.3mg·L-1，ZnSO4·7H2O 8.6mg·L-1，H3BO36.2mg·L-1，KI 0.83mg·L-1，NaMoO4·2H2O 0.25mg·L-1，CuSO4·5H2O 0.025mg·L-1，CoCl2·6H2O 0.025mg·L-1，Na2-EDTA 37.3mg·L-1，FeSO4·7H20 27.8mg·L-1，盐酸硫胺素0.1mg·L-1，盐酸吡哆醇0.5mg·L-1，烟酸0.5mg·L-1，肌醇100mg·L-1，甘氨酸2.0mg·L-1。 【当前权利人】山东省林业科学研究院 【当前专利权人地址】山东省济南市文化东路42号 【统一社会信用代码】123700004955723840 【家族被引证次数】12
