【摘要】 一种从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，属于藻蓝蛋白分离纯化技术领域。本发明应用经冻溶和低离子强度溶涨快速提取C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白，然后经硫酸铵沉淀进行初步纯化，最后利用琼脂糖凝胶FF(DEAE Sepharose Fast Flow)离子交换层析技术，用恒定的离子强度、pH梯度的缓冲液进行洗脱，一步法可以得到高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。本方法操作简便，省时省力，对设备要求简单，得率高并且大大降低了CPC和APC的制备成本，从而为将CPC和APC应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础。 【专利类型】发明授权 【申请人】山东大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】250100 山东省济南市历下区山大南路27号 【申请人地区】中国 【申请人城市】济南市 【申请人区县】历下区 【申请号】CN200810014404.0 【申请日】2008-02-28 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101240010B 【公开公告日】2010-06-02 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101240010B 【授权公告日】2010-06-02 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C07K1/14; C07K1/30; C07K1/18 【发明人】张玉忠; 颜世敢; 陈秀兰; 张熙颖; 周百成 【主权项内容】从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，步骤如下：(1)原料为蓝藻，采用液氮研磨的方法，使蓝藻解体溶解，离心去除细胞残渣，收集上清液得到C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白粗提液；(2)将步骤(1)的粗提液，用硫酸铵沉淀法，使C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白从粗提液中沉淀出来，离心收集沉淀，再用pH5.8～6.0、20mM磷酸缓冲液溶解并透析，除去硫酸铵，即得C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液；(3)将步骤(2)制得的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液，用离子交换层析，并用具有恒定的离子强度、连续pH梯度的缓冲液进行洗脱，分别获得高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。 【当前权利人】山东大学 【当前专利权人地址】山东省济南市历下区山大南路27号 【统一社会信用代码】12100000495570303U 【引证次数】1.0 【被引证次数】2 【他引次数】1.0 【被他引次数】2.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】10
