【摘要】 本发明公开了一种羊种布鲁氏菌的重组菌。本发明提供的羊种布鲁氏菌的重组疫苗菌，是将羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)中的冷休克蛋白的编码基因灭活得到的菌株。与出发菌株相比，本发明得到的菌株的毒力比现行疫苗M5小，无需灭活就可以作为疫苗免疫动物。使用本发明的菌株免疫小鼠，通过PCR方法可以鉴定出患病动物体内分离到的菌株是疫苗菌株还是野生菌株。本发明对布鲁氏菌病疫苗的改造、诊断鉴别试剂的研制，开发布鲁氏菌基因缺失标记疫苗和配套的鉴别诊断试剂，促进全球动物布鲁氏菌病的根除和净化具有十分重要的意义。 【专利类型】发明授权 【申请人】中国农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100094 北京市海淀区圆明园西路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810224819.0 【申请日】2008-10-22 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101386832B 【公开公告日】2010-12-08 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101386832B 【授权公告日】2010-12-08 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12N1/21; A61K39/10; A61P31/04; C12R1/01N; C12R1/01 【发明人】吴清民; 牛建蕊; 刘文娟; 任婕; 张兴林; 李娜; 杨羽; 刘文晓; 王真; 张春燕 【主权项内容】羊种布鲁氏菌的重组菌，是通过将DNA片段DM11导入羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M中，利用同源重组将冷休克蛋白的编码基因灭活后得到的；所述DNA片段DM11是以pWUM381：5’‑GGAATTCTGTCACGCTTCCAAGTC‑3’和pWUM384：5’‑GGGGTACCGGAAAGAAGCAGATGG‑3’为引物，通过将同源臂DM11‑1和同源臂DM11‑2连接得到的，同源臂DM11‑1和同源臂DM11‑2能够与羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M基因组中的冷休克蛋白编码基因的上游序列和下游序列发生同源重组；所述同源臂DM11‑1是以羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M的基因组DNA为模板，以pWUM381：5’‑GGAATTCTGTCACGCTTCCAAGTC‑3’和pWUM382：5’‑AAGCTTCGTAAGAAATGCAGATTT‑3’为引物PCR扩增获得的；所述同源臂DM11‑2是以羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M的基因组DNA为模板，以pWUM383：5’‑TTACGAAGCTTGTCCGGTCTGTGCCATG‑3’和pWUM384：5’‑GGGGTACCGGAAAGAAGCAGATGG‑3’为引物PCR扩增获得的。 ： 【当前权利人】中国农业大学 【当前专利权人地址】北京市海淀区圆明园西路2号 【统一社会信用代码】12100000400018162G 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】4
