【摘要】 本发明提供一种用于牡丹组织培养的方法,包括下列步骤:(1)外植体的灭菌;(2)灭菌处理后的外置体接种子基本培养基PM;(3)外植体转接到增殖培养基中继续培养。本发明还提供一种更适于牡丹组织无菌培养的改良的基本培养基PM和增殖培养基。在本发明的牡丹组织的无菌培养方法中,采用将外植体先用70%酒精消毒,然后用0.2-0.5%次氯酸消毒,剥去外植体外壳,再用0.1%次氯酸再次进行灭菌的方法,大大降低了外植体的污染率,显著提高了组织培养的存活率。此外,发明的基本培养基PM是在MS培养基的基础上,改变了其中的大量元素的组成和含量,减少了基本培养基中盐分的总摩尔数,提高了外植体的增殖率,同时降低了牡丹培养物的褐变,也避免了高盐培养基对植株生长的抑制。 【专利类型】发明授权 【申请人】北京林业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100083 北京市海淀区清华东路35号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200810089691.1 【申请日】2008-04-14 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101248764B 【公开公告日】2010-06-02 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101248764B 【授权公告日】2010-06-02 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12N5/04; A01H4/00 【发明人】罗晓芳; 张俊琦 【主权项内容】1.一种用于牡丹组织无菌培养的基本培养基PM,其组成为:296mg/L NH4NO3、370mg/L MgSO4·7H2O、340mg/L KH2PO4、95.55mg/L CaCl2·2H2O、990mg/LK2SO4、1309.8mg/L Ca(NO3)2·4H2O、1900mg/L KNO3、27.8mg/L FeSO4·7H2O37.3mg/L Na2-EDTA、22.3mg/L MnSO4·4H2O、8.6mg/LZnSO4·7H2O、6.2mg/LH3BO3、0.025mg/L CuSO4·5H2O、0.25mg/L Na2MoO4·2H2O、0.83mg/L KI、0.025mg/L CoCl2·6H2O、0.1mg/L盐酸硫胺素、0.5mg/L盐酸吡哆辛、0.5mg/L烟酸VB5、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇。 【当前权利人】北京林业大学 【当前专利权人地址】北京市海淀区清华东路35号 【统一社会信用代码】12100000400006719W 【家族被引证次数】5