【摘要】 本发明公开了一种产腈水合酶工程菌及其构建方法和应用，本发明产腈水 合酶工程菌就是敲除或抑制了产腈水合酶原始菌株中的酰胺酶基因后得到的产 腈水合酶突变菌株。该工程菌的构建方法是利用携带酰胺酶基因片断的重组自 杀质粒，与野生菌的酰胺酶基因进行同源重组，通过自杀质粒大片断的插入阻 断野生菌中酰胺酶基因的表达。本发明的产腈水合酶工程菌与相应的野生菌相 比，其细胞生长和腈水合酶表达均有所提高；并且在催化水合丙烯腈生产丙烯 酰胺的过程中，产物丙烯酰胺的生成量显著提高，副产物丙烯酸的生成量大大 降低。产品质量高，精制成本低，在微生物法生产丙烯酰胺过程中具有广泛的 应用前景。 【专利类型】发明申请 【申请人】清华大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】100084中国北京市海淀区清华大学化学工程系工物馆482室 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】海淀区 【申请号】CN200880000969.1 【申请日】2008-03-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101663389A 【公开公告日】2010-03-03 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101663389B 【授权公告日】2011-12-28 【授权公告年份】2011.0 【IPC分类号】C12N1/21; C12N9/78; C12P13/02; C12R1/125; C12R1/15; C12R1/365; C12R1/38 【发明人】于慧敏; 马玉超; 刘昌春; 沈忠耀 【主权项内容】1、一种产腈水合酶工程菌， 其特征在于所述的工程菌是敲除或抑制了产腈 水合酶原始菌株中的酰胺酶基因后得到的产腈水合酶突变菌株。 【当前权利人】清华大学 【当前专利权人地址】北京市海淀区清华大学化学工程系工物馆482室 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12100000400000624D 【被引证次数】10 【被自引次数】6.0 【被他引次数】4.0 【家族引证次数】25.0 【家族被引证次数】37
