【摘要】 本发明公开了一种重组细胞分裂素rPFGF的制备方法。本发明采用毕赤酵母 表达体系，将血小板衍生生长因子PDGF与碱性成纤维细胞生长因子bFGF拼合 基因与表达载体pMEX9K连接，构建成新的表达质粒pMEX-rPFGF，经线性化 后电转化宿主菌巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris GS 115，经过随机挑选和加压筛 选，获得生产菌株G-PFGF2，使重组细胞分裂素rPFGF在毕赤酵母工程菌Pichia pastoris G-PFGF2上清中获得表达。经离心、超滤、离子交换层析、疏水层析、 凝胶层析获得纯度高于95％的重组细胞分裂素rPFGF。将该重组细胞分裂素 rPFGF添加于护肤品中，有促进皮肤细胞新陈代谢，滋养皮肤的功效。 数据由整理 【专利类型】发明申请 【申请人】北京爱柯森伦生物工程科技有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】100071北京市丰台区航丰路1号时代财富天地大厦2305 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】丰台区 【申请号】CN200810211379.5 【申请日】2008-09-24 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101684473A 【公开公告日】2010-03-31 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12N15/62; C12N15/81; C12N1/19; C07K14/475; A61K8/64; C12R1/84; A61K8/30; C07K14/435 【发明人】曹晓梅; 周红; 吕鹏 【主权项内容】1、一种重组细胞分裂素rPFGF的制备方法。 其特征在于：将血小板衍生生长因子PDGF-BB与碱性成纤维细胞生长因子 bFGF基因的cDNA进行串联拼合，形成重组细胞分裂素rPFGF基因，以毕赤酵母 作表达系统，将重组细胞分裂素rPFGF基因插入酵母表达载体，构建成新的表达质 粒，经线性化后电转化宿主菌，经过随机挑选和加压筛选，获得生产菌株G-PFGF2， 使重组细胞分裂素rPFGF在毕赤酵母工程菌Pichia pastoris G-PFGF2上清中获得表 达。 【当前权利人】北京爱柯森伦生物工程科技有限公司 【当前专利权人地址】北京市丰台区航丰路1号时代财富天地大厦2305 【专利权人类型】有限责任公司 【统一社会信用代码】91110106660528353G 【被引证次数】1 【被他引次数】1.0 【家族被引证次数】1
