【摘要】 本发明涉及一种使用荧光RT-PCR技术定量检测ARHGDIB基因mRNA的方法。本发明针对人的ARHGDIB基因mRNA两个外显子结合部位设计荧光探针并筛选到最佳PCR检测方案,并提供相应的一步法RT-PCR定量检测方法并形成了相应试剂盒。本发明提供人工合成的RNA,制作标准曲线,用于对mRNA进行定量分析;本发明定量准确,检测速度快,能排除基因组DNA的干扰,特异性强,且灵敏度高,可用于ARHGDIB基因表达方面的研究和临床。 【专利类型】发明申请 【申请人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】200010 上海市黄浦区复兴东路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】上海市 【申请人区县】黄浦区 【申请号】CN200810201648.X 【申请日】2008-10-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760524A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/68; G01N21/64 【发明人】何剑军; 夏懿 【主权项内容】1.一种使用荧光RT-PCR技术定量检测ARHGDIB基因mRNA的方法,其特征在于包含一对特异性引物和一条特异性探针,扩增目标片段长度为139bp,引物和探针序列为:引物1:5`-ACCACAGAAGTCCCTGAAAGAGCT-3`(Seq No.1)引物2:5`-GGTGAGCCGGGTGACAACGAC-3`(Seq No.2)探针1:5`-TCGGATCTGTCACCACAGGACCA-3`(Seq No.3)或探针2:5`-TGGTCCTGTGGTGACAGATCCGA-3`(Seq No.4)或探针3:5`-TGTGGTGACAGATCCGAA-3`(Seq No.5)或探针4:5`-TTCGGATCTGTCACCACA-3`(Seq No.6)或者上述引物序列的互补序列,或者上述序列同源性大于75%的序列。 【当前权利人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【当前专利权人地址】上海市黄浦区复兴东路2号; 上海市宜山路1289号 【专利权人类型】其他股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】913100001330605412 【被引证次数】2 【被他引次数】2.0 【家族被引证次数】2