【摘要】 本发明属于食品中过敏原的检测技术，具体地说是用实时荧光PCR技术检测食品中鱼类过敏原的试剂盒及方法。试剂盒包括PCR扩增反应液A、阳性对照DNA B；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、UNG酶、Taq酶、上游引物5′-CAGGACAAGAGTGGCTTCAT-3′、下游引物5′-GAAGTTCTGCAGGAACAGCTT-3′、TaqMan-MGB探针5′-AGGAGGA(T/G)GAGCT-3′；鱼类过敏原的快速检测方法包括食品DNA的提取、鱼类过敏原基因的实时荧光PCR扩增和结果判定。其优点是快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。 【专利类型】发明授权 【申请人】山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 【申请人类型】机关团体 【申请人地址】266002 山东省青岛市市南区瞿塘峡路70号 【申请人地区】中国 【申请人城市】青岛市 【申请人区县】市南区 【申请号】CN200810008082.9 【申请日】2008-03-07 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101250582B 【公开公告日】2010-09-08 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101250582B 【授权公告日】2010-09-08 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12Q1/68 【发明人】孙敏; 高宏伟; 梁成珠; 林超 【主权项内容】一种鱼类过敏原快速检测试剂盒，其特征在于其中的试剂包括(1)-(2)：(1)PCR扩增反应液A包括10×PCR反应缓冲液、0.1-0.4mmol/L dNTP(含dUTP)、2-4mmol/L硫酸镁、1-2U Taq酶、0.2-0.5U UNG酶、0.2-0.6μmol/L上游引物、0.2-0.6μmol/L下游引物′、0.2-0.6μmol/L TaqMan-MGB探针；其中10×PCR反应缓冲液含有100mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、500mmol/L氯化钾和1％曲拉通X-100；其中上游引物序列为：5′-CAGGACAAGAGTGGCTTCAT-3′、下游引物序列为：5′-GAAGTTCTGCAGGAACAGCTT-3′；其中TaqMan-MGB探针中间部位有一个兼并碱基，序列为：5′-AGGAGGA(T/G)GAGCT-3′；(2)UNG酶：1U/μL。 【当前权利人】山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 【当前专利权人地址】山东省青岛市市南区瞿塘峡路70号 【统一社会信用代码】12100000756930347P 【引证次数】1.0 【他引次数】1.0 【家族引证次数】1.0 【家族被引证次数】14
