【摘要】 一种江米酒酒药微生物源凝乳酶的制备方法。 本发明利用江米面作为培养基，通过酒药发酵生产 江米酒，采用硫酸铵分级沉淀法从江米酒中提取凝 乳酶，进一步使用SephadexG-100和DEAE-Seph- adex A-50纯化，得到高纯度的凝乳酶。以该方法 产凝乳酶，原料广泛、成本低廉、操作简单、 发酵周期短，所产凝乳酶活力高，纯化后凝乳活 力达4360±50U/mg，蛋白回收率为16.21± 1.98％。 【专利类型】发明授权 【申请人】天津科技大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】300222天津市河西区大沽南路1038号 【申请人地区】中国 【申请人城市】天津市 【申请人区县】河西区 【申请号】CN200810052629.5 【申请日】2008-04-08 【申请年份】2008 【公开公告号】CN100593035C 【公开公告日】2010-03-03 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN100593035C 【授权公告日】2010-03-03 【授权公告年份】2010.0 【IPC分类号】C12N9/52 【发明人】王艳萍; 程巧玲; 张阳 【主权项内容】1.一种江米酒酒药微生物源凝乳酶的制备方法，其特征在于：该方法利用江米面作 为培养基，通过酒药发酵生产江米酒，采用硫酸铵分级沉淀法从江米酒中提取凝乳酶，进 一步使用Sephadex G-100和DEAE-Sephadex A-50纯化凝乳酶，其具体步骤包括： 第一、江米酒的制备：以10g/100mL的江米面溶液、115℃灭菌20min，室温下冷却 至30℃作为培养基，将酒药按0.0032g酒药/g江米面的接种量，加入前述冷却好的培养 基中，140转/分钟振荡培养50～54小时，得到江米酒； 第二、离心：将第一步得到的江米酒在4℃、3500转/分钟条件下离心10min，取上 清液备用； 第三、凝乳酶的提取：将硫酸铵烘干研细，取第二步得到的上清液，向其中缓慢加入 硫酸铵粉末至其饱和度达到40％，4℃静置2小时后，以7000转/分钟离心15min，取上 清液，继续加入硫酸铵粉末至其饱和度达到90％，4℃静置2小时，以8000转/分钟离心 15min，沉淀溶于0.005mol/L、pH6.28的磷酸盐缓冲液中，4℃透析48小时，即为凝乳酶 粗液。 【当前权利人】上海瀚厨餐饮管理有限公司 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12120000401359524M 【引证次数】2.0 【他引次数】2.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】3
