【摘要】 本发明涉及一种使用ACTB基因分析ARHGDIB基因表达量的RT-PCR技术。本发明分别根据人的ARHGDIB基因mRNA和ACTB基因mRNA设计并筛选到最佳PCR检测方案，能同时对标本中的两个基因的mRNA进行检测，根据两个基因的mRNA检测Ct值与正常对照两个基因的mRNA检测Ct值的ΔΔCt值，可分析ARHGDIB基因与看家基因-ACTB基因之间的相对表达量。同时本发明提供相应的一步RT-PCR检测试剂盒。本发明还提供人工合成的两种RNA，减少假阴性的发生率；本发明检测速度快，能排除基因组DNA的干扰，特异性强，且灵敏度高，可用于ARHGDIB基因表达方面的研究和临床。。 【专利类型】发明申请 【申请人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】200010 上海市黄浦区复兴东路2号 【申请人地区】中国 【申请人城市】上海市 【申请人区县】黄浦区 【申请号】CN200810201645.6 【申请日】2008-10-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760523A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/68; G01N21/64 【发明人】何剑军; 夏懿 【主权项内容】1.一种使用ACTB基因分析ARHGDIB基因表达量的RT-PCR技术，其特征在于包含用于检测ARHGDIB基因mRNA的一对特异性引物和一条特异性探针以及用于检测ACTB基因mRNA的一对特异性引物和一条特异性探针，扩增目标片段长度分别为139bp和147bp，引物和探针序列分别为：检测ARHGDIB基因mRNA的引物和探针：引物1：5`-ACCACAGAAGTCCCTGAAAGAGCT-3`(Seq No.1)引物2：5`-GGTGAGCCGGGTGACAACGAC-3`(Seq No.2)探针1：5`-TCGGATCTGTCACCACAGGACCA-3`(Seq No.3)或探针2：5`-TGGTCCTGTGGTGACAGATCCGA-3`(Seq No.4)检测ACTB基因mRNA的引物和探针：引物3：5`-CAATGAGCTGCGTGTGGCAG-3`(Seq No.5)引物4：5`-AGCACAGCCTGGATAGCAAC-3`(Seq No.6)探针3：5`-CGAGAAGATGACCCAGATCATGTTTG-3`(Seq No.7)或者上述引物序列的互补序列，或者上述序列同源性大于75％的序列。 【当前权利人】上海复星医药(集团)股份有限公司; 上海复星医学科技发展有限公司 【当前专利权人地址】上海市黄浦区复兴东路2号; 上海市宜山路1289号 【专利权人类型】其他股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】913100001330605412 【被引证次数】4 【被他引次数】4.0 【家族被引证次数】4
