【摘要】 本发明涉及一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法，包括：(1)从人全血中分离B细胞，并从人微量B细胞中扩增人抗体重链和轻链基因片段；(2)从步骤(1)中获得的基因片段用RT-PCR方法获得人抗体的轻链和重链功能性片段，分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV；(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21，人抗体重链或轻链片段表达后，同时分泌于培养液上清，并形成人单克隆抗体片段复合物。与现有技术相比，本发明构建人单克隆抗体片段复合物的方法工艺先进独特，操作简单，制得的人单克隆抗体片段复合物和抗原特异性结合优良、专一性强，使用安全，有应用于人癌症或传染性疾病的检测和治疗的可能性。 【专利类型】发明申请 【申请人】上海凯勃生物技术有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】201108 上海市闵行区金都路4299号D幢2057号 【申请人地区】中国 【申请人城市】上海市 【申请人区县】闵行区 【申请号】CN200810204695.X 【申请日】2008-12-16 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101748130A 【公开公告日】2010-06-23 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12N15/13; C12N15/70; C07K16/18 【发明人】龚祖埙; 吴鸿菲; 吴建华; 张祖传; 张奉武; 沈菊英; 姚亚媄 【主权项内容】一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)从人全血中分离B细胞，并从人微量B细胞中用RT-PCR方法扩增人抗体重链和轻链基因片段；(2)从步骤(1)中获得的基因片段，分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV；(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21，人抗体重链和轻链片段表达后，同时分泌于培养液上清，并形成复合物，该复合物为人单克隆抗体片段复合物。 【当前权利人】上海凯勃生物技术有限公司 【当前专利权人地址】上海市闵行区金都路4299号D幢2057号 【专利权人类型】其他有限责任公司 【统一社会信用代码】91310112773289627U 【引证次数】1.0 【自引次数】1.0 【家族引证次数】1.0
