【摘要】 本发明公开了大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法,该方法包括如下几个步骤:(1)根据茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因的核苷酸序列,设计PCR引物进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET22b(+)中,构建表达载体pET22b-proMTG,转化为大肠杆菌E.coli BL21/proMTG,该菌株保藏号为CCTCC M 208240;(2)可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原;(3)转谷氨酰胺酶酶原的激活;(4)高密度发酵;(5)蛋白纯化工艺。本发明方法的转谷氨酰胺酶产量及比活力达到直接在大肠杆菌中表达形成包涵体并经变性及复性生产该酶的水平,而且发酵生产工艺更简单。 【专利类型】发明申请 【申请人】华南理工大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】510640 广东省广州市天河区五山路381号 【申请人地区】中国 【申请人城市】广州市 【申请人区县】天河区 【申请号】CN200810220160.1 【申请日】2008-12-19 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101691560A 【公开公告日】2010-04-07 【公开公告年份】2010 【授权公告号】CN101691560B 【授权公告日】2011-08-31 【授权公告年份】2011.0 【IPC分类号】C12N1/21; C12N15/54; C12N15/70; C12N9/10; C12R1/19 【发明人】潘力; 杨慧林; 苗小康; 崔翠 【主权项内容】1.一种大肠杆菌E.coli BL21/proMTG,其特征在于:该菌株保藏号为CCTCC M208240。 【当前权利人】华南理工大学 【当前专利权人地址】广东省广州市天河区五山路381号 【统一社会信用代码】12100000455414429R 【被引证次数】15 【被自引次数】3.0 【被他引次数】12.0 【家族引证次数】2.0 【家族被引证次数】15