【摘要】 植物中参与抗性反应的基因可以分为抗病基因和防卫反应基因。在抗白粉病的防御体系中,除抗白粉病基因以外,防卫反应基因如病程相关基因(pathogenesis-related gene)等对于抵御白粉病的侵害都有一定的作用,因此,由于研究策略或实验技术方面的原因,相关克隆存在克隆抗白粉病病程相关基因和抗白粉病(候选)基因两个方面。 【专利类型】发明申请 【申请人】李祥 【申请人类型】个人 【申请人地址】271000 山东省泰安市泰山区金山路61号 【申请人地区】中国 【申请人城市】泰安市 【申请人区县】泰山区 【申请号】CN200810238570.9 【申请日】2008-12-19 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760461A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12N15/29 【发明人】李祥 【主权项内容】1.Srichumpa等(2005)利用与Pm3b紧密连锁的分子标记对含有Pm3位点10个等位基因的10个品系进行了单元型分析,发现所有品系都有一个由与Pm3b共分离的标记界定的基因组保守区域,该区域包含一个结构上与Pm3b相似的基因。然后以含有Pm3a、Pm3d和Pm3f的品系为材料进行PCR为基础的同源克隆,得到三个类似Pm3b的序列。通过瞬间转化(transient transformation)分析发现,所得到的Pm3a、Pm3d和Pm3f的候选基因均能提供分别由AvrPm3a-、AvrPm3d-和AvrPm3f-3个基因产物诱导的抗性,在氨基酸水平上,Pm3a、Pm3b、Pm3d和Pm3f编码产物有高达97.8%的相似性,在coiled-coil结构域内4种蛋白质氨基酸序列100%保守,但在NBS区内存在序列交换,表明在等位基因之间存在基因内重组(intragenicrecombination)或基因转换(gene conversion),这些证据说明所克隆的3个候选基因是真正的抗白粉病基因,且Pm3a、Pm3b、Pm3d和Pm3f4个基因是等位基因。 1.Srichumpa等(2005)利用与Pm3b紧密连锁的分子标记对含有Pm3位点10个等位基因的10个品系进行了单元型分析,发现所有品系都有一个由与Pm3b共分离的标记界定的基因组保守区域,该区域包含一个结构上与Pm3b相似的基因。然后以含有Pm3a、Pm3d和Pm3f的品系为材料进行PCR为基础的同源克隆,得到三个类似Pm3b的序列。通过瞬间转化(transient transformation)分析发现,所得到的Pm3a、Pm3d和Pm3f的候选基因均能提供分别由AvrPm3a-、AvrPm3d-和AvrPm3f-3个基因产物诱导的抗性,在氨基酸水平上,Pm3a、Pm3b、Pm3d和Pm3f编码产物有高达97.8%的相似性,在coiled-coil结构域内4种蛋白质氨基酸序列100%保守,但在NBS区内存在序列交换,表明在等位基因之间存在基因内重组(intragenicrecombination)或基因转换(gene conversion),这些证据说明所克隆的3个候选基因是真正的抗白粉病基因,且Pm3a、Pm3b、Pm3d和Pm3f4个基因是等位基因。 【当前权利人】李祥 【当前专利权人地址】山东省泰安市泰山区金山路61号