【摘要】 本发明提供了一个表达鸡新城疫病毒核壳蛋白基因(NP)的重组T4噬菌体，该重组T4噬菌体具有新城疫病毒核壳蛋白基因(NP)的核苷酸序列和NP蛋白的氨基酸残基序列。NDVF48E9国内标准强毒株及质粒pET30a均由哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室保存。NDV F48E9国内标准强毒株NP基因的重组质粒pGFP-NP由哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室构建。本发明还涉及重组T4噬菌体具有检测鸡血清中ND抗体的用途。。 【专利类型】发明申请 【申请人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【申请人类型】企业 【申请人地址】300300 天津市东丽开发区六经路6号 【申请人地区】中国 【申请人城市】天津市 【申请人区县】东丽区 【申请号】CN200810154337.2 【申请日】2008-12-23 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101760467A 【公开公告日】2010-06-30 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12N15/45; C12N15/63; C12N7/01; G01N33/569; C12N15/40 【发明人】苏建东; 王小娥; 李旭东 【主权项内容】1.含有新城疫病病毒核壳蛋白基因(NP)的重组T4噬菌体的构建方法，其特征在采用基因重组的方法获得的，其方法是：用Hind III和Not I在37℃分别消化NP基因的PCR产物和质粒pET30a，接着在T4连接酶的作用之下，连接消化的NP基因的PCR产物和质粒pET30a，用连接产物转化大肠杆菌DH5α，经Amp′抗性筛选，获得插入了NP基因的重组子，然后用1对通用引物进行PCR筛选；对PCR筛选阳性的细菌，挑取单菌落接种于3mL。LB培养基中，37℃，200r/m振摇培养16-20小时，抽提质粒，再经限制性内切酶消化和序列测定，获得含有新城疫病病毒核壳蛋白基因(NP)的重组整合质粒pET30a-NP；用重组整合质粒pET30a-NP和缺陷性T4噬菌体T4-Z1进行同源重组，获得表达NP蛋白的重组T4噬菌体。 【当前权利人】天津瑞普生物技术股份有限公司 【当前专利权人地址】天津市东丽开发区六经路6号 【专利权人类型】股份有限公司(上市) 【统一社会信用代码】91120116730357968N
