【摘要】 本发明涉及细胞疾病靶标的负选择,更具体地说,本发明涉及使用 基于RNAi的负筛选测定来鉴定参与活化调节元件的基因。 【专利类型】发明申请 【申请人】北京微生物流行病研究所 【申请人类型】科研单位 【申请人地址】100071北京市丰台区东大街20号 【申请人地区】中国 【申请人城市】北京市 【申请人区县】丰台区 【申请号】CN200810146797.0 【申请日】2008-08-29 【申请年份】2008 【公开公告号】CN101659990A 【公开公告日】2010-03-03 【公开公告年份】2010 【IPC分类号】C12Q1/68; C12N15/11; C12N15/54; C12N15/867; C12N5/10 【发明人】童贻刚; 安小平; 张昕 【主权项内容】1.在宿主细胞中鉴定促进调节元件活性的基因组序列的方法,其 包括确定在暴露于筛选剂后仍存活的宿主细胞中表达的小发夹RNA分 子的多核苷酸序列,其中: (a)所述细胞经改造含有表达效应子蛋白的表达盒,在所述细胞 暴露于所述筛选剂时所述效应子蛋白具有细胞毒性, (b)将编码所述效应子蛋白的序列与促进该效应子蛋白表达的调 节元件可操作性连接,和 (c)用至少一种表达小发夹RNA分子的载体转化所述细胞,其中 所述小发夹RNA分子: (i)具有与宿主细胞基因组序列互补的多核苷酸序列,和 (ii)靶向具有上述基因组序列的核酸由此阻止该基因组序列的表 达, 其中所述小发夹RNA分子的互补多核苷酸序列的身份指示了宿主 细胞的所述基因组序列,当宿主细胞中不存在该小发夹RNA时所述基 因组序列将促进所述表达盒调节元件的活化。 【当前权利人】北京微生物流行病研究所 【当前专利权人地址】北京市丰台区东大街20号 【被引证次数】4 【被他引次数】4.0 【家族被引证次数】4