【摘要】 一种离体诱导冬枣花药愈伤组织的方法，即通过 冬枣花药的组织培养获得其愈伤组织，愈伤组织诱导率达 86.23％，包括外植体采集、消毒、初始诱导、增殖培养。在5～ 6月选取田间直径为0.3～0.6cm、花萼尚未张开的冬枣未成熟 花蕾，4℃冰箱预处理1～3d。流水冲洗1～2h，超净工作台上 将花蕾放入70％乙醇30s，再转入0.1％ HgCl2溶液中8min，无菌水冲洗 3～4次后剥取花药，启动培养时将无菌花药接种在MS+麦芽 糖15～20g/L+TDZ0.5－ 1.0mg/L+NAA0－ 0.5mg/L的培养基上进行暗培养三周，然后转至 弱光下(800～1000Lux)培养。花药逐渐产生黄绿色的、松散颗 粒状的愈伤组织，且随培养时间的延长逐渐增多。增殖培养时 将获得的初始愈伤组织转接到MS+麦芽糖15～ 20g/L+TDZ0.1－ 0.5mg/L+NAA0－ 0.5mg/L的培养基中进行增殖培养，愈伤组织可 快速增殖。以上培养基基本培养基为MS培养基，麦芽糖15～ 20g/L，琼脂3.5g/L，培养基灭菌前pH为5.8～6.0。光照周期 为15小时光照、9小时黑暗。光照强度800～1000Lux。温度 控制在27±1℃。该方法可在70d左右获得大量冬枣花药愈伤 组织。 【专利类型】发明申请 【申请人】河北农业大学 【申请人类型】学校 【申请人地址】071001河北省保定市南市区灵雨寺街289号河北农业大学 【申请人地区】中国 【申请人城市】保定市 【申请人区县】莲池区 【申请号】CN200610139091.2 【申请日】2006-10-09 【申请年份】2006 【公开公告号】CN1934932A 【公开公告日】2007-03-28 【公开公告年份】2007 【发明人】刘孟军; 王娜; 赵锦; 秦子禹 【主权项内容】1.一种离体诱导冬枣花药愈伤组织的方法，其特征在于通过对冬枣花药进行组织培 养，获得其愈伤组织，愈伤组织诱导率达86.23％。 【当前权利人】河北农业大学 【当前专利权人地址】河北省保定市南市区灵雨寺街289号河北农业大学 【专利权人类型】公立 【统一社会信用代码】12130000401707023F 【被引证次数】7 【被自引次数】2.0 【家族被引证次数】7
